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登革熱檢測試劑（elisa）Panbio Dengue IgM Capture ELISA 用于定性檢測血清中登革熱病原的 IgM 抗體，輔助臨床實驗室診斷出現(xiàn)登革熱病毒臨床癥狀的患者。Panbio Dengue IgM Capture ELISA 應(yīng)該與其它登革熱血清測試聯(lián)用。
更新時間：2025-01-03
登革熱檢測試劑（elisa)
Panbio Dengue IgM Capture ELISA
產(chǎn)品目錄號 01PE20
預期用途
Panbio Dengue IgM Capture ELISA 用于定性檢測血清中登革熱病原的 IgM 抗體，輔助臨床實驗室診斷出現(xiàn)登革熱病毒臨床癥狀的患者。Panbio Dengue IgM Capture ELISA 應(yīng)該與其它登革熱血清測試聯(lián)用。
登革熱病毒是黃病毒屬，主要分布于熱帶和亞熱帶地區(qū)。通過蚊子傳播，主要是埃及伊蚊和白紋伊蚊。登革熱病毒感染可導致一系列的臨床癥狀，從不明顯的癥狀到致死性的出血性疾病。典型登革熱或斷骨熱的特征是突然發(fā)熱、劇烈頭痛、肌痛、關(guān)節(jié)痛和皮疹。雙相發(fā)熱病程常見失眠和厭食，失去味覺或口苦。登革出血熱和登革休克綜合征都是嚴重的并發(fā)癥，通常與感染第二種血清型有關(guān)。利用 ELISA 方法檢測登革熱病毒的 IgM 抗體是非常重要的程序，尤其是對于繼發(fā)性登革熱病毒感染，繼發(fā)性感染患者并發(fā)癥的發(fā)生幾率較高。盡管檢測水平在感染后八個月仍存在，登革熱出現(xiàn)三至五天后便可檢測到血清 IgM 抗體且通常可持續(xù) 30-90 天。
血清中存在的登革熱病毒 IgM 抗體，與微孔測試條上聚苯乙烯表面附著的抗人 IgM 抗體結(jié)合。用抗原稀釋劑將濃縮的登革熱 1-4 型抗原溶液稀釋到正確的工作容積。用昆蟲細胞表達系統(tǒng)產(chǎn)生抗原，用特異性單克隆抗體純化抗原。在稀釋后的抗原中添加等體積的辣根過氧化物酶（HRP）標記單克隆抗體（MAb），形成抗原 MAb 復合物。清洗測定板上的剩余血清，將抗原 MAb 復合物添加到測定板中。在培養(yǎng)完成后清洗微孔，再添加無色的底物系統(tǒng)- 四甲基聯(lián)苯胺/*（TMB 顯色液）。底物被酶水解后，顯色液變藍。用酸終止反應(yīng)后，TMB 變黃。顯色表示測試樣本中存在抗登革熱 IgM 抗體。
4. 樣本稀釋劑– 2 瓶， 50 mL（粉色）。即用型。Tris 緩沖生理鹽水（pH 7.2 – 7.6），含防腐劑（0.1% Proclin™）和添加劑。有效期內(nèi)儲存于 2-8℃可保持穩(wěn)定。
5. 抗原稀釋劑 – 1 瓶，50mL（無色）。即用型。磷酸鹽緩沖液，含防腐劑（0.1% Proclin™和 0.005%
慶大霉素）。有效期內(nèi)儲存于 2-8℃可保持穩(wěn)定。
6. HRP 標記單克隆抗體示蹤劑 – 1 瓶，7mL（黃色）。即用型。辣根過氧化物酶（HRP）標記單克隆抗體示蹤劑，含防腐劑（0.1% Proclin™）和蛋白穩(wěn)定劑。有效期內(nèi)儲存于 2-8℃可保持穩(wěn)定。
7. TMB 顯色液（TMB） - 1 瓶，15mL。即用型。3,3’,5,5'-四甲基聯(lián)苯胺和*的混合物，存放于枸櫞酸鹽緩沖液中（pH 3.5 – 3.8）。有效期內(nèi)儲存于 2-8℃可保持穩(wěn)定。
8. 陽性質(zhì)控品– 1 瓶，黑色瓶蓋，200μL 人血清（含 0.1%疊氮話鈉和 0.005%硫酸慶大霉素）。有效期內(nèi)儲存于 2-8℃可保持穩(wěn)定。
9. 校準品– 1 瓶，橙色瓶蓋，400μL 人血清（含 0.1%疊氮話鈉和 0.005%硫酸慶大霉素）。有效期內(nèi)儲存于 2-8℃可保持穩(wěn)定。
10. 陰性質(zhì)控品– 1 瓶，白色瓶蓋，200μL 人血清（含 0.1%疊氮話鈉和 0.005%硫酸慶大霉素）。有效期內(nèi)儲存于 2-8℃可保持穩(wěn)定。
11. 終止液 – 1 瓶，紅色瓶蓋，15mL。即用型。1M 磷酸。有效期內(nèi)儲存于 2-25℃可保持穩(wěn)定。
需要但未提供的材料
1. 精確、可調(diào)節(jié)的微量移液器，含一次性吸液頭（5-1000 μL 容積）
2. 去離子水
3. 標板清洗系統(tǒng)
4. 酶標儀，含 450nm 濾波器
5. 計時器
6. 刻度量筒
7. 燒瓶
8. 試管或微滴定板，用于稀釋血清
9. 稀釋抗原的玻璃管或塑料管
用于體外診斷
1. 在制備質(zhì)控品的過程中使用的所有人源性材料已經(jīng)過人類免疫缺陷病毒 1/2（HIV 1/2）抗體、丙肝
（HCV）和乙肝表面抗原的檢測，結(jié)果為陰性。但是，任何測試方法都不能*確信，且所有人源性質(zhì)控品和抗原都應(yīng)按照潛在傳染性材料處理。疾病控制和預防中心以及美國國立衛(wèi)生研究院建議將潛在傳染原按照生物安全二級 1 處理。
2. 該測試只能使用血清執(zhí)行。尚未建立使用全血、血漿或其它標本基質(zhì)的方法。
3. 不可使用黃疸或脂血癥血清，以及出現(xiàn)溶血或微生物生長的血清。
4. 不可加熱，否則血清將失去活性。
5. 在開始檢測前所有試劑必須平衡至室溫（20-25℃）。檢測受溫度變化的影響。微孔板在達到室溫
（20-25℃）之前不可從密封袋中取出。
6. 直接用干凈的吸液頭從試劑瓶中吸出試劑。轉(zhuǎn)移試劑可能導致污染。
7. 未使用的微孔應(yīng)該立即重新密封并儲存于干燥環(huán)境中。 否則將產(chǎn)生錯誤結(jié)果。
8. 底物系統(tǒng)：
(a) 由于 TMB 易受金屬離子的污染，所以底物系統(tǒng)不能與金屬表面接觸。
(b) 避免長時間陽光直射。
(c) 有些清潔劑可干擾 TMB 的性能。
(d) TMB 可能呈現(xiàn)淡藍色，這不影響底物的活性或測定結(jié)果。
9. 某些試劑盒組成包含疊氮話鈉，疊氮話鈉可能與鉛或銅管反應(yīng)形成極易爆炸的金屬疊氮化合物。通過管道裝置處理這些試劑時，請用大量清水沖洗以避免疊氮化物在排水管內(nèi)累積。
疊氮話鈉還抑制酶標物的活性。在添加酶標物時必須使用干凈的吸液頭，避免攜帶其它試劑的疊氮話鈉。
登革熱檢測試劑（elisa)
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